Dr William Masters, przede wszystkim ginekolog z Uniwersytetu Waszyngtońskiego, prowadzi odnoszącą sukcesy medyczną praktykę za dnia, a także realizuje tajne badania nad ludzką seksualnością nocą. Była piosenkarka w klubie nocnym Virginia Johnson dołącza do szpitalnego personelu i okazuje się być niezwykle przydatna w pracy Mastersa.